Quelles sont les méthodes d’estimation du sucre réducteur ?

1. Test de Fehling :

- La solution de Fehling est constituée d'un mélange de sulfate de cuivre et de tartrate de potassium et de sodium.

- Lorsqu'un sucre réducteur est chauffé en milieu alcalin avec la solution de Fehling, il réduit les ions cuivriques (Cu2+) en ions cuivreux (Cu+).

- La réduction des ions cuivriques se traduit par la formation d'un précipité rouge orangé d'oxyde cuivreux (Cu2O).

- La quantité de sucre réducteur présente est déterminée par la mesure de la quantité d'ions cuivre réduits, qui peut être quantifiée par colorimétrie.

2. Le test de Benoît :

- La solution de Benedict est similaire à la solution de Fehling, mais elle contient des ions citrate au lieu des ions tartrate.

- Le principe du test de Benedict est le même que celui de Fehling :il s'agit de réduire les ions cuivriques en ions cuivreux par des sucres réducteurs.

- La réduction se traduit par un changement de couleur du bleu au vert, jaune, orange et enfin à un précipité rouge d'oxyde cuivreux.

- La quantité de sucre réducteur présente est déterminée en observant le changement de couleur et en la comparant à un nuancier standard.

3. Méthode DNS (acide 3,5-dinitrosalicylique) :

- La méthode DNS est un dosage colorimétrique des sucres réducteurs basé sur la réaction des sucres réducteurs avec le réactif acide 3,5-dinitrosalicylique (DNS).

- Lorsqu'ils sont chauffés dans des conditions acides, les sucres réducteurs réduisent le DNS pour former un produit coloré avec une absorbance maximale à 540 nm.

- L'intensité de la couleur formée est proportionnelle à la concentration en sucres réducteurs dans l'échantillon.

- La quantité de sucre réducteur présente est quantifiée en mesurant l'absorbance de la solution à 540 nm et en la comparant à une courbe étalon.

4. Méthode Somogyi-Nelson :

- La méthode Somogyi-Nelson est un autre test colorimétrique des sucres réducteurs.

- Il s'agit de la réaction de sucres réducteurs avec une solution alcaline de sulfate de cuivre pour former un complexe cuivre-sucre.

- Ce complexe est ensuite traité avec le réactif arsénolybdate, qui réduit les ions cuivre complexés et produit une solution de couleur bleue.

- La quantité de sucre réducteur présente est déterminée en mesurant l'absorbance de la solution bleue à 520 nm et en la comparant à une courbe étalon.

5. Chromatographie liquide haute performance (HPLC) :

- La HPLC est une technique de séparation permettant d'analyser et de quantifier les sucres réducteurs dans des mélanges complexes.

- Il sépare les composés en fonction de leurs propriétés chimiques et de leurs interactions avec la phase stationnaire de la colonne.

- Les sucres réducteurs peuvent être détectés et quantifiés à l'aide de détecteurs à indice de réfraction (RI) ou ultraviolet-visible (UV-Vis).

- La HPLC fournit une analyse précise et sensible des sucres réducteurs individuels dans les échantillons.

Ce sont quelques-unes des méthodes couramment utilisées pour l’estimation des sucres réducteurs. Le choix de la méthode dépend de facteurs tels que la matrice d'échantillon, le niveau souhaité de précision et de sensibilité et la disponibilité de l'instrumentation.