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Quali sono i metodi di stima della riduzione dello zucchero?
1. Test di Fehling:
- La soluzione di Fehling è costituita da una miscela di solfato di rame e tartrato di sodio e potassio.
- Quando uno zucchero riducente viene riscaldato in un ambiente alcalino con la soluzione di Fehling, riduce gli ioni rameici (Cu2+) in ioni rameosi (Cu+).
- La riduzione degli ioni rameici è segnalata dalla formazione di un precipitato rosso-arancio di ossido rameoso (Cu2O).
- La quantità di zucchero riducente presente viene determinata misurando la quantità di ioni rame ridotti, che possono essere quantificati colorimetricamente.
2. Il test di Benedetto:
- La soluzione di Benedict è simile alla soluzione di Fehling, ma contiene ioni citrato invece di ioni tartrato.
- Il principio del test di Benedict è lo stesso del test di Fehling, che prevede la riduzione degli ioni rameici a ioni rameosi mediante riduzione degli zuccheri.
- La riduzione è segnalata da un viraggio di colore dal blu al verde, giallo, arancione ed infine ad un precipitato rosso di ossido rameoso.
- La quantità di zucchero riducente presente viene determinata osservando il cambiamento di colore e confrontandolo con una tabella colori standard.
3. Metodo DNS (acido 3,5-dinitrosalicilico):
- Il metodo DNS è un test colorimetrico per gli zuccheri riduttori basato sulla reazione degli zuccheri riduttori con il reagente acido 3,5-dinitrosalicilico (DNS).
- Se riscaldati in condizioni acide, gli zuccheri riducenti riducono il DNS per formare un prodotto colorato con un massimo di assorbanza a 540 nm.
- L'intensità del colore che si forma è proporzionale alla concentrazione di zuccheri riduttori nel campione.
- La quantità di zucchero riducente presente viene quantificata misurando l'assorbanza della soluzione a 540 nm e confrontandola con una curva standard.
4. Metodo Somogyi-Nelson:
- Il metodo Somogyi-Nelson è un altro dosaggio colorimetrico per la riduzione degli zuccheri.
- Implica la reazione degli zuccheri riducenti con una soluzione alcalina di solfato di rame per formare un complesso rame-zucchero.
- Questo complesso viene quindi trattato con il reagente arsenomolibdato, che riduce gli ioni rame complessati e produce una soluzione di colore blu.
- La quantità di zucchero riducente presente viene determinata misurando l'assorbanza della soluzione blu a 520 nm e confrontandola con una curva standard.
5. Cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC):
- L'HPLC è una tecnica di separazione che può essere utilizzata per analizzare e quantificare gli zuccheri riducenti in miscele complesse.
- Separa i composti in base alle loro proprietà chimiche e alle interazioni con la fase stazionaria della colonna.
- Gli zuccheri riduttori possono essere rilevati e quantificati utilizzando rilevatori di indice di rifrazione (RI) o ultravioletti-visibili (UV-Vis).
- L'HPLC fornisce analisi accurate e sensibili dei singoli zuccheri riducenti nei campioni.
Questi sono alcuni dei metodi comunemente utilizzati per la stima degli zuccheri riducenti. La scelta del metodo dipende da fattori quali la matrice del campione, il livello desiderato di accuratezza e sensibilità e la disponibilità della strumentazione.
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